O percurso começa junto à antiga Alfândega em Vila Real de Santo António, cidade com uma localização privilegiada: a foz do Rio Guadiana a nascente, a praia a sul, o pinhal a poente e a Reserva Natural do Sapal de Castro Marim a norte. De Vila Real de Santo António segue em direção a Monte Gordo, Altura e Manta Rota, uma zona lagunar com importante valor ecológico. No concelho de Tavira, o percurso passa na proximidade das vilas de Santa Luzia e de Luz de Tavira e segue por Olhão, cidade que se destaca pela sua história e arquitetura, até Faro.